山海棠总生物碱可诱导肺腺癌A549细胞凋亡

第三军医大学军事预防医学院卫生毒理学教研室科研人员完成的一项国家自然科学基金课题中发现，昆明山海棠总生物碱（THHa）可明显抑制人肺腺癌A549细胞增殖，并可诱导其凋亡。这一研究结果，为THHa开发应用于临床肺癌的综合治疗提供了新思路。

THHa是从卫茅科雷公藤属植物昆明山海棠根茎和根皮中提取的主要成分。有研究表明，THHa临床治疗自身免疫性疾病疗效较好，对血液系统肿瘤有抑制作用，但对实体瘤特别是肺癌的抑制作用，目前国内外鲜有报道。

为探讨THHa对肺癌的治疗作用及其机理，科研人员采用体外实验研究方法，将人肺腺癌A549细胞株稀释成单细胞悬液后，加入THHa溶液放于培养板中进行培养，并设对照组（只加入等体积的细胞，不加药液）与实验组作比较。经培养、染色、荧光显微镜及流式细胞仪检测等方法，观察A549细胞形态学变化及凋亡情况。结果发现：实验组经THHa作用后，A549细胞形态变圆，体积缩小，核颜色加深，折光性加强，A549细胞明显受到生长抑制，其抑制作用呈药物浓度和时间依赖性；而对照组细胞则出现贴壁生长，胞浆饱满，融合成片，无核固缩现象。两组A549细胞生长抑制率相比，有显著性差异（P<0.05）。此外，经流式细胞仪检测还发现，实验组在浓度为12.5微克/毫升 THHa作用下，A549细胞24小时的凋亡率为3.37%，48小时为8.90%；浓度增大为200微克/毫升时，24小时和48小时A549细胞的凋亡率分别为20.16%和28.34%，两种浓度细胞凋亡率相比，有显著性差异（P<0.01）。提示THHa诱导A549细胞在一定范围内有时间和剂量依赖性，浓度和作用时间增加，细胞的凋亡率也逐渐升高，同时其抑制率（浓度和时间正相关性）与凋亡率（浓度与时间正相关性）之间呈正直线相关关系（P<0.01）。

据指导此项研究的曹佳教授介绍，细胞凋亡是一个主动的多基因参与调节的细胞自杀过程，在控制肿瘤细胞的增殖和死亡过程中起重要作用。细胞增殖需要通过凋亡来维持细胞数目的恒定，滞后的细胞死亡往往导致人多种癌症的发生。许多抗癌制剂都是通过凋亡途径激发细胞毒性来达到抗肿瘤的目的，因而能否引起肿瘤细胞凋亡和诱导凋亡能力的高低，是评价化疗药物优劣的重要指标之一。本研究结果表明，THHa在体外能诱导肺癌细胞凋亡，具有抗肺癌的生物活性，这为THHa用于肺癌的治疗提供了实验依据。