研究发现：蜂毒素可抑制肝癌细胞增殖

第二军医大学长海医院中医科近日在提取高纯度蜂毒素的基础上，开展了蜂毒素抗肿瘤的疗效及作用机制的研究，发现蜂毒素可抑制肝癌细胞的生长、增殖，并且减少增殖细胞中核抗原（PCNA）阳性细胞的表达，影响细胞周期的比率，为蜂毒素临床应用于抗肿瘤提供了实验依据。

蜂毒素是蜂毒的主要活性成分，约占蜂毒干重的50％。近年来，随着蜂毒分离、提取、纯化技术的不断提高，对蜂毒素的功能及作用机制的研究也日益广泛。有研究表明蜂毒素可以通过多种途径影响细胞的信号传导系统，诱导细胞凋亡，并具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应。

研究人员采用台盼蓝染色法测定细胞的生长曲线，四唑盐比色试验测定细胞增殖的抑制率，流式细胞仪检测细胞周期和细胞PCNA的表达，观察蜂毒素处理前后肝癌细胞SMMC7721变化情况。结果表明，蜂毒素可明显抑制肝癌细胞SMMC7721的生长、增殖，PCNA阳性细胞表达率随着蜂毒素剂量的增加而降低，经蜂毒素作用后的细胞周期表现为S期细胞增加，G2/M期细胞减少。

研究人员介绍，以往的研究显示，大剂量蜂毒素在体外对多种肿瘤细胞有极强的杀伤作用，而小剂量蜂毒素具有明显诱导细胞凋亡的作用。本实验结果显示，4、16微克/毫升蜂毒素对肝癌细胞的生长有明显的抑制作用，并且4微克/毫升蜂毒素处理组经台盼蓝染色发现细胞坏死率不足1％，说明此浓度的蜂毒素对SMMC7721生长的抑制不是通过细胞毒作用，而有可能是通过细胞凋亡途径。进一步研究表明蜂毒素可以显著降低PCNA的表达，并与浓度呈负相关。PCNA对细胞周期有重要的调控作用，其合成和表达与细胞的增殖状态密切相关，蜂毒素对SMMC7721肝癌细胞生长的抑制有可能与PCNA的表达降低有关。

另外，鉴于肿瘤的特征之一是细胞周期异常，使肿瘤细胞无限增殖，因而肿瘤治疗的中心环节就是干扰细胞周期，从而影响肿瘤细胞的生长、增殖或诱导肿瘤细胞凋亡。本实验通过流式细胞仪观察了蜂毒素处理后细胞周期变化，发现4、16微克/毫升蜂毒素可影响SMMC7721细胞的细胞周期正常移行，阻止S期细胞进入G2/M期，造成S期细胞聚集，G2/M期细胞减少。

研究人员指出，蜂毒来源丰富，作用广泛，生物活性强，是医药和生物工程方面的重要原料。但蜂毒在肿瘤临床应用方面尚受到一些毒副作用的限制，随着蜂毒素提纯技术的进步及对其结构、剂型改造研究的深入，蜂毒在肿瘤的临床治疗方面的价值将会越来越大。