ATP生物发光法微生物速测技术研究获突破

针对目前食品安全监测以及检验检疫部门对微生物快速检测的需求，ATP生物发光法微生物数量快速测定技术由广东省微生物研究所攻关完成，这一被列为广东省重点科技攻关的项目近期通过了由广东省科技厅组织的成果鉴定。

据介绍，微生物数量检测是微生物分析检测中的重要项目，传统的方法需进行长时间微生物培养，检测周期长，检测条件要求较高，不能满足食品、药品及化妆品企业进行生产质量控制以及出入境检验检疫、质量技术监督和疾病控制等部门进行环境卫生监督现场检测的要求。目前，这一问题已经成为微生物分析检测中存在的关键性难题。而ATP生物发光检测技术，利用细菌的ATP作为荧光素酶催化发光的必需底物，且与发光强度呈线性关系这一原理，对微生物数量进行快速检测。其过程无需培养，操作简便、灵敏度高，在短时间内即可得到检测结果，是目前检测微生物最快的方法之一。

据科研人员介绍，该成果从筛选和优化细胞ATP释放剂着手，通过微生物细胞ATP的释放机理研究，成功地解除了ATP释放剂对发光测定体系的抑制作用，筛选和组合出微生物细胞ATP释放剂，实现了微生物细胞ATP的有效提取，建立了较为成熟和完善的微生物细胞ATP提取技术；成功地采用以焦磷酸酶为主要成分的非目标细胞ATP消除剂AE、测定条件优化、相关性分析和抗干扰及快速检测技术ATP集成研究，摸索出合适的测定体系，确立了检测限达102～103cells／ml的生物发光微生物数量快速测定技术，显著提高了检测的准确性和灵敏度；将ATP生物发光技术和抗干扰生物培养技术进行有机集成，发明了ATP生物发光法微生物数量抗干扰快速测定技术，细菌、酵母及霉菌可分别在12、24、36小时内完成检测，检测灵敏度与常规方法比较，检测时间缩短2／3，灵敏度提高30～100倍，适于低菌数样品检测；建立了样品前处理技术和样品对发光系统抑制的消除方法，将ATP生物发光快速检测技术应用于饮用水藻类环境微生物及食品微生物数量的快速检测，整个检测过程可控制在30分钟内，显著提高了检测效率；首次将ATP生物发光法应用于消毒杀菌剂效果评估，并建立了非目标细胞ATP的消除方法，评估时间由传统的7～10天缩短到1～3小时，提高了评估效率。

据了解，该成果正在开发的配套发光检测试剂盒和发光检测仪，为实现ATP生物发光微生物快速检测技术的大规模应用打下良好的基础。

专家鉴定认为，该成果总体技术达到国内领先水平，部分技术达到国际先进水平。成果不但在目前具有较大的市场前景，而且是今后这一领域的发展方向，建议进一步加强实际应用中的影响因素评估与研究，以满足市场的需求。